PRÁCTICA 1(incluye parte 1, 2 , 3 y 4)
OBJETIVO.
Visualizar células sanguíneas al microscopio
FUNDAMENTO.
Nuestra sangre está compuesta básicamente de plasma o fluido líquido extracelular y células con diferentes funciones y esto es muy fácil de ver al microscopio.
Una célula sanguínea también llamado célula hematopoyéticas, es una célula producida a través de la hematopoyesis se encuentra principalmente en la sangre. Los principales tipos de células sanguíneas incluyen. Glóbulos rojos (eritrocitos),Glóbulos blancos(leucocitos) y Plaquetas (trombocitos).
MATERIAL Y REACTIVOS.
MATERIAL REACTIVOS
-Pipeta. -Muestra de sangre.
-Cubreobjetos.
-Portaobjetos.
-Microscopio.
-Tubo de ensayo.
TÉCNICA Y PROCEDIMIENTO.
1.Cogemos 5 ml de muestra sanguínea con la ayuda de una pipeta de 5 ml.
2.Depositamos la muestra en un tubo de ensayo previamente rotulado.
3.Con la ayuda de una Pipeta Pasteur a una distancia de 2 o 3 cm dejamos caer 1 gota de sangre en el medio de el portaobjetos para así favorecer la extensión de las células sobre el portaobjetos.
4.A continuación visualizaremos la muestra al microscopio empezaremos con un aumento de 10 ,40 y 100 sucesivamente.
RESULTADOS.
OBSERVACIONES.
PARTE 2: SEPARACIÓN DE LA SANGRE EN FASES POR CENTRIFUGACIÓN.
Objectiu
Separació de la sang per centrifugació
Fonament
La sang esta composta per 2 fases:
· 1
Fase sòlida -> son els elements formes (eritròcits, leucòcits i
plaquetes).
· 2
Fase líquida -> és el plasma.
Amdós components es poden separar per
mitjà de centrifugació de sang anticoagulada in vitro.
Mostres, materials i equips utilitzats.
· Mostres:
- Sang
· Material:
- Pipeta graduada i
aspirador manual de pipeta.
- Motle.
- Tub per a centrigufa.
- Parafim.
- Retolador permanent.
· Equips:
- Centrífuga.
Procediment
1. Connectar
la centrífuga 30 minuts abans de realitzar la pràctica.
2. Col·locar
el material necessari per a esta parte de la pràctica en la taula de treball.
3. Homogeneïtzar
manualment el tub amb la mostra de sang.
4. Amb
l'ajuda de la pipeta graduada pipetear 3 ml de sang i depositar-los en un tub
de centrifuga que ja haurem retolat i tapar amb el parafilm.
5. Centrifugar
la mostra a 1500 rpm durante 30 minuts.
6. Transcorregut
el temps de la centrifucació cal traure el tub i observar les distintes fases.
Part 3:Obtenció de plasma sanguini per centrifugació de sang.
Objectiu
Obtenció de plasma sanguini per
centrifugació de la sang.
Fonament
La sang esta composta per 2 fases;
una fase sòlida y altra líquida.
El plasma és la part líquida de la
sang, té un color groguenc translúcid i en ell suren tots els elements formes;
constituïx aproximadament el 55% del volum sanguini.
El plasma s'obté per centrifugació de
sang anticoagulada. L'anticoagulant que s'h d'utilitzar depén de les tècniques
que es vaja a aplicar posteriorment.
Mostres, materials i equips utilitzats.
· Mostres:
- Plasma sanguini.
· Material:
- Tub per a
centrigufa amb la muestra anterior.
- Pipeta Pasteur
de vidre i pera de goma per a pipeteo.
- Motle.
- Tub Eppendorf.
- Parafim col·locat en
el tub de centrifuga de la mostra anterior.
- Retolador permanent.
· Equips:
- Centrífuga.
Procediment
1. Treballarem
amb la mostra anterior (part 2)
2. Col·locar
el material necessari per a esta parte de la pràctica en la taula de treball.
3. Centrifugar
novament la mostra anterior perè esta vegada a 2500 rpm durant 5 minuts per a
obtindre el plasma sanguini.
4. Amb
l'ajuda de la pipeta Pasteur de vidre agafar el plasma y col·locar-ho en un tub
Eppendorf que haurem retolat préviament amb el nom i data de la mostra que
col·locarem.
5. Col·locar
el tub Eppendorf amb la mostra en un motle per a depositar-la en el congelador.
Part 4:Observació de preparacions de sang tenyides.
Objectiu
Observació de preparacions de sang
tenyides
Fonament
Per a l'observació de les cèl·lules
cal tindre en compte que no tenen el contrast suficient per si soles per a ser
visualitzades amb el miscroscopi òptic per tant devem ternyir-las.
Al ternyir-les podemo distingir els
tipus cel·lulars presents en la mostra.
Mostres, materials i equips utilitzats.
· Material:
- Portaobjectes amb
extensió tenyida.
· Equips:
- Microscopi
òptic.
Procediment
1. Col·locar
el material necessari per a esta parte de la pràctica en la taula de treball.
2. Observar
al microscopi òptic el portaobjectes amb l'extensió de sang perfifèrica
tenyida.
· 1ª
Observació: amb el objectiu de 4x
· 2ª
Observació: amb el objectiu de 10x
· 3ª
Observació: amb el objectiu de 40x
3. Apuntar
resultats.
Comentarios
Publicar un comentario